Análisis de Northern blot de miR-18a y miR-25 y su patrón mecanicista en la progresión del cáncer de hígado

El cáncer de hígado es uno de los más comunes en todo el mundo, producto de una desregulación de los microRNAs, sobre todo de miR-18a y miR-25 presentes en etapas tempranas. Para el análisis de Northern blot, se extrae el ARN mediante TRIzol, se ejecuta en geles de poliacrilamida desnaturalizantes al 12%, luego se transfiere a membranas de nailon (Ambion). Para la hibridación de las membranas se usaron sondas miR-18a y miR-25 (Sigma) marcadas con digoxigenina (DIG) y ARN U6 como control de carga. En conclusion los miR-18a y miR-25 pueden usarse como biomarcadores pronósticos para el cáncer de hígado en etapas tempranas.

Imagen 1. Análisis de Northern blot de muestras de pacientes con cáncer de hígado en estadio temprano, tardío y metastásico que expresan miR-18a y miR-25. El ARN U6 actúa como control para los experimentos. Recuperado de: Figura - PMC (nih.gov)

Referencias bibliográficas:

1.	Lu Y, Min Z, Qin A, Wu J, Jiang X, Qiao Z. Papel de la disrupción de miR-18a y miR-25 y su patrón mecanicista en la progresión del cáncer de hígado. [Online]; 2020. Acceso 24 de diciembre de 2023. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6987266/.

Aplicación de PCR y qPCR en la detección del VPH

Tema: Detección del VPH en muestras de mucosa oral en pacientes pediátricos

Objetivo: Evaluar la sensibilidad de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la detección del VPH en diferentes muestras.

Muestra: Mucosa oral 

Tipo de ácido nucleico: ADN viral.

Extracción: Se extrajo utilizando el kit de extracción de ADN genómico PureLink (Invitrogen, Carlsbad, California, EE. UU.), siguiendo las recomendaciones del fabricante.

Genes a analizar: Gen L1 

Tamaño en pares de base: 150 pb del gen a amplificar

Tipo de PCR: PCR convencional y PCR en tiempo real (qPCR).

Pasos:

40 ciclos 

- Desnaturalización: 15 segundos a 95 °C

- Hibridación: 30 segundos a 60 °C

- Elongación: 30 segundos a 72 °C

 Al final de los ciclos, las muestras se sometieron a análisis de disociación a 65°C-95°C.

Visualización:

 

 Referencia Bibliográfica:

 1. Gama AR. Detección del VPH en muestras de mucosa oral en pacientes pediátricos. [Online]; 2020. Acceso 16 de diciembrede 2023. Disponible en: https://www.scielo.br/j/jbpml/a/mkTHfmYWp9f4nXhzbCkfb9p/?format=html&lang=pt#

Alteraciones epigenéticas en el cáncer de ovario

La hipermetilación del gen supresor de tumores BRCA1 en el cáncer de ovario es una alteración epigenética importante, ya que una metilación anormal puede silenciar la expresión de BRCA1, contribuyendo a la inestabilidad genómica y aumentando el riesgo de desarrollar tumores

Imagen 1. Principales mutaciones asociadas al cáncer de ovario hereditario Recuperado de: https://rochepacientes.es/content/dam/roche-pacientes-2/es/assets/images/mutacion-cancer-ovario.png

Referencia Bibliográfica:

1. Sociedad Española de Oncologia Medica. Los avances en Cáncer de Ovario. [Online]; 2020. Acceso 07 de Diciembrede 2023. Disponible en:  https://seom.org/los-avances-en-cancer-de-ovario

Alteraciones en la traducción de la anemia de células falciformes

 

La anemia de células falciformes ocurre por mutación de la cadena de beta-globina causada por el ácido glutámico sustituido por valina en el sexto codón, lo que origina la formación de una hemoglobina anómala (HbS) ßs, su solubilidad disminuye en desoxigenación, produciendo eritrocitos falciformes.

Imagen 1. Anemia de células falciformes. Recuperado de: Anemia de células falciforme | PPT (slideshare.net)

Referencia Bibliográfica:

1.	Samuel SS, Jain N. Hepatopatía de células falciformes. [Online]; 2023. Acceso 3 de noviembrede 2023. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK574502/.