Terapia epigenomica en el cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)

Tema: Actividad de algunos Agomirs y Antigomirs como supresor del carcinoma de pulmón de células no pequeñas (NSCLC).

Mecanismo epigenómico tratado: Silenciamiento génico por ncRNA (MicroARNs).

Cómo se lo hizo: Se transfirieron tres formas de ARN no codificante en líneas celulares: incluyeron agomirs de microARNs (miRNA-135a y miRNA-34a), moléculas antisentido de ARN largo no codificante (HOTAIR), y antagomirs correspondientes. Se evaluó la viabilidad celular con XTT y la eficiencia de transfección se determinó mediante qPCR en tiempo real.

Resultados: Los resultados mostraron una significativa viabilidad celular con miARNs 135a y 34a, y HOTAIR, agomirs, antagomirs y moleculas antisentido del mismo RNA no codificante, además la expresión génica en la línea celular A549 mostró cambios tras la transfección, sugiriendo una prometedora terapia para carcinoma pulmonar.

Referencia bibliográfica:

1.	Mosa ZSAd, Aubaid AH. The activity of some Agomirs and Antigomirs. [Online]; 2023. Acceso 24 de febrerode 2024. Disponible en: https://www.revhipertension.com/rlh_5_2023/4_the_activity_some_agomirs.pdf.

Técnicas de Edición de Ácidos Nucleicos en la Hemofilia A y B

Artículo: La administración in vivo de CRISPR-Cas9 mediante nanopartículas lipídicas permite la edición génica de la antitrombina para el tratamiento sostenible de la hemofilia A y B

1.- Tipo de Edición (in vivo o ex vivo, somática o germinal): Edición in vivo, somática.

2.- Dirigido hacía: El gen SERPINC1, que codifica la antitrombina.(AT)

3.- Dirigido por: sgRNA y SpCas9

4.- Uso de vectores: Nanopartículas Lipídicas (LNP)

5.- Órgano a tratar: Hígado

6.- Vía de administración: Administración por vía intravenosa

7.-Resultados a corto, mediano y largo plazo:

Corto plazo: Reducción significativa de la concentración de antitrombina en sangre, mejora la generación de trombina y se reducen la hemorragia espontánea en modelos animales de hemofilia.

Mediano plazo: Estabilización de la concentración de antitrombina en sangre y mantenimiento de los efectos terapéuticos durante al menos 10 meses en modelos animales.

Largo plazo: Se sugiere la posibilidad de un efecto terapéutico sostenido y duradero en pacientes humanos, aunque se necesitan más estudios para confirmar.

Imagen 1. Se seleccionó el locus AT como gen diana para el reequilibrio. Recuperado de: La administración in vivo de CRISPR-Cas9 mediante nanopartículas lipídicas permite la edición génica de la antitrombina para el tratamiento sostenible de la hemofilia A y B - PMC (nih.gov)

Referencia bibliográfica:

1.- Han JP, Kim M, Choi BS, Lee JH, Lee GS, Jeong M, et al. La administración in vivo de CRISPR-Cas9 mediante nanopartículas lipídicas permite la edición génica de la antitrombina para el tratamiento sostenible de la hemofilia A y B.[Internet]. [citado 18 de febrero de 2024]; Disponible en:La administración in vivo de CRISPR-Cas9 mediante nanopartículas lipídicas permite la edición génica de la antitrombina para el tratamiento sostenible de la hemofilia A y B - PMC (nih.gov)La administración in vivo de CRISPR-Cas9 mediante nanopartículas lipídicas permite la edición génica de la antitrombina para el tratamiento sostenible de la hemofilia A y B - PMC (nih.gov)

Terapia Regenerativa con Células Madre Mesenquimales (MSC) en la Artritis Reumatoide

Titulo: Efecto terapéutico de la administración intravenosa repetida a intervalos largos de células madre mesenquimales derivadas de la sangre del cordón umbilical humano en ratones DBA/1 con artritis inducida por colágeno

Tipo de Stem Cell:   células madre mesenquimales derivadas de la sangre del cordón umbilical (hUCB-­MSC)

Método de obtención: Aislamiento y cultivo de hUCB­-MSC.

Vía de administración:   inyección intravenosa de hUCB­-MSC

Resultados a corto, mediano y largo plazo: 

A corto plazo, reduce significativamente la gravedad de la Artritis Reumatoide. 

A medio plazo, puede mejorar la función articular y la calidad de vida.

A largo plazo, podría frenar el progreso de la enfermedad y reducir la necesidad de medicación inmunosupresora. Sin embargo, se necesitan más estudios para confirmar estos efectos a largo plazo

Imagen 1. Efectos inmunomoduladores de las células madre mesenquimales y sus factores secretados en la artritis reumatoide. Recuperado de: Click on image to zoom (nih.gov)

Referencia bibliográfica:

1.-  Yu Y, Yoon KA, Kang TW, Jeon HJ, Sim YB, Choe SH, et al. Efecto terapéutico de la administración intravenosa repetida a intervalos largos de células madre mesenquimales derivadas de la sangre del cordón umbilical humano en ratones DBA/1 con artritis inducida por colágeno. [Online]; 2019. Acceso 10 de febrerode 2024. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30959558/.

Ejemplo de ADN recombinante artificial y ejemplo de recombinación de ácidos nucleicos en la naturaleza

1.- Ejemplo de ADN recombinante para el diagnóstico de la Malaria.

La malaria es una enfermedad endémica en 91 países, siendo transmitida por la picadura de mosquitos, que transmiten a los parásitos del género Plasmodium, siendo las más frecuentes P. vivax y P. falciparum. Para su diagnóstico se emplean varias técnicas, y materiales, pero que demuestran baja sensibilidad, o baja sensibilidad y especificidad, como en la microscopía o detección de anticuerpos, es por ello que se emplea la tecnología del ADN recombinante para la clonación de diversas secuencias de Plasmodium y utilizarlas como controles en el diagnóstico molecular.

T: Clonacion de secuencias de Plasmodium para su uso como controles en el diagnóstico molecular

O: obtener secuencias clonadas de P.vivax y P. falciparum para su uso como controles en la técnica de PCR para el diagnóstico de malaria.

G:  ARN ribosomal de la subunidad pequeña de P. vivax 120 pb y P. falciparum 205 pb

ER: No menciona el artículo

EL: ADN ligasa T4

V: pGEM®-T Easy 

CR: Transformación, Procariota: Escherichia coli de la cepa XL1-Blue MRF`

MTG: transformación por choque térmico (30 min 4°C, 90 seg 42°C, 2 min 4°C).

MIC:  Cultivo, PCR multiplex, PCR de colonias y PCR de ADN 

plasmídico

  

2.- Ejemplo de recombinación de ácidos nucleicos en la naturaleza.

Las levaduras usan enzimas recombinasas para reparar roturas y generar diversidad genética en su ADN

Imagen 1. Corte de un grupo de células de Saccharomyces cerevisiae vistas a microscopio electrónico, esta imagen está coloreada artificialmente. Recuperado de: CIL:40654, Saccharomyces cerevisiae. CIL. Dataset (cellimagelibrary.org)

Referencia bibliográfica:

1.- Pacheco C, Ferrer E, Herrera F. CLONACIÓN DE SECUENCIAS DE Plasmodium PARA SU USO COMO. [Online]; 2019. Acceso 4 de Febrerode 2024. Disponible en:https://www.researchgate.net/profile/Cesar-Pacheco-6/publication/340492225_CLONACION_DE_SECUENCIAS_DE_Plasmodium_PARA_SU_USO_COMO_CONTROLES_EN_EL_DIAGNOSTICO_MOLECULAR_CLONING_OF_Plasmodium_SEQUENCES_FOR_ITS_USE_AS_CONTROLS_IN_THE_MOLECULAR_DIAGNOSIS/link.

2.- Sociedad Española de Microbiología. Diseño de un péptido señal mejorado para la producción de enzimas. [Online]; 2021. Acceso 4 de Febrerode 2024. Disponible en: https://digital.csic.es/bitstream/10261/266669/1/XVIII-Congreso-Nacional-de-Microbiologi%cc%81a_Molpeceres%20Garc%c3%ada_2021.pdf.